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高效液相色谱法简介

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来源:发布日期 2017-02-20 14:51:00浏览:-
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高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称高速液相色谱高分离度液相色谱近代柱色谱等。高效液相色谱是的一个重要分支,以液体为,采用高压输液系统,将具有不同的单一溶剂或不同比例的、缓冲液等流动相泵入装有固定相的,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对分析。

该方法已成为化学、医学、工业、农学、等学科领域中重要的分离分析技术应用。

高效液相色谱法有四高一广的特点:

①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对加高压。

高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在1530分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。

高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业和气相色谱的分离效能高出许多倍。

高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。

应用范围广:百分之七十以上的可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。

柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物

样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。高效液相色谱的缺点是有柱外效应。在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。


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